在線脫氣的定義：在線脫氣即是儀器運行過程中，由脫氣泵對流動相進行脫氣處理。

高效液相色譜儀簡介：

高效液相色譜運行所需要的基本組成為液相色譜儀和流動相。高效液相色譜儀（HPLC）由泵、進樣器、柱溫箱、檢測器四部分組成。泵可分為單泵、雙泵、四元泵；進樣器從功能上可簡單的分為自動進樣器和手動進樣器；檢測器在HPLC中，常用的有單波長紫外檢測器、二極管陣列紫外檢測器和質(zhì)譜檢測器。一般流動相在儀器運行過程中會依次經(jīng)過泵、進樣器、柱溫箱和檢測器。

氣泡生的來源：

在液相色譜對有機物分析過程，由于有機物在各類型色譜柱中保留特性的不同，我們需要使用不同比例的流動相作為洗脫劑對樣品進行分離洗脫，從而達到化合物的分離和純化。常用流動相有甲醇、乙腈和水，根據(jù)實驗需要往往需要用到甲醇-水洗脫體系、乙腈-水甚至甲醇-乙腈-水體系，一般來說，液相色譜使用的各種流動相液體中都會含有不同溶解量的氣體，當(dāng)溫度升高、劇烈震動、壓力下降等情況下容易產(chǎn)生氣泡；另外還有一種情況是，當(dāng)兩種不同的溶劑混合時，熱力學(xué)體積發(fā)生變化，會引起氣泡的產(chǎn)生，尤其在梯度變化過程中；此外，在單泵使用中，常常需要甲醇與水的切換使用，在吸濾頭表面往往會有較多的氣泡溢出。

氣泡效液相色譜儀檢測的危害：

由于氣體的可壓縮性，在氣泡進入到泵內(nèi)，而滯留情況下，會導(dǎo)致系統(tǒng)壓力波動和流速不穩(wěn)；同時，當(dāng)氣泡進入色譜柱時，引起所分析的樣品與色譜柱填料作用位點減少，故而使樣品保留時間等產(chǎn)生影響；氣泡進入檢測器會使譜圖出現(xiàn)鬼峰和雜峰、基線漂移等，影響測定結(jié)果，如果混入氣體含有氧氣，其與待測樣品某些基團反應(yīng)，產(chǎn)生熒光淬滅現(xiàn)象，可能會造成靈敏度下降或者不出峰；此外，系統(tǒng)中的氣體尤其是氧氣會與色譜柱某些填料反應(yīng)，引起柱效降低，使色譜柱使用壽命縮短，因此，在線脫氣對于液相色譜來說十分重要。

減少氣泡儀器危害的其他方法：

那該如何避免氣泡所產(chǎn)生的這些影響呢？除上述所說的在線脫氣外，在有條件的情況下，我們可以對含水溶液進行超聲脫氣處理，一般超聲5-10 min即可；還有在實驗過程中，避免環(huán)境溫度產(chǎn)生較大的變化，定期清洗流動相吸濾頭或者更換。

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